作者：陳偉岳 俞勇 杜蓬

【摘要】

目的   探討丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）、酶聯免疫檢測（ELISA）在丙型肝炎早期診斷中的應用價值。

方法 83例抗-HCV陽性、500例ALT異常但抗-HCV陰性血清同時進行HCV-cAgELISA和HCV-PCR。

結果 83例抗-HCV陽性血清中HCV-cAg和HCV RNA陽性分別為33例和36例，其中32例共陽性；500例ALT異常但抗-HCV陰性的血清中有3例HCV-cAg和HCV RNA同為陽性。抗-HCV陽性和陰性血清HCV-cAg和HCV RNA檢測結果符合率分別為94.0%和100%。

結論  HCV-cAgELISA敏感性與HCV-PCR類似，能夠有效縮短窗口期，操作簡便，費用低廉，在丙型肝炎早期診斷中具有很好的前景。

一、資料與方法

1.1樣本來源 

83份抗-HCV陽性血清來自寧波市中心血站無償獻血者，年齡18~55周歲，平均年齡29.11±10.37歲。

500例ALT異常但抗-HCV陰性的血清來自寧波市第二醫院輸血科，年齡18~85周歲，平均年齡32.33±15.43歲。

1.2檢測試劑 

HCV-cAgELISA購自山東萊博生物科技有限公司；

HCV-PCR試劑盒購自中山大學中山醫學院達安基因診斷中心。

1.3檢測方法

速率法檢測ALT，酶聯免疫法（ELISA）檢測抗-HCV和HCV-cAg，RT-PCR檢測HCV RNA，使用儀器為美國ABI公司的7500型熒光定量PCR儀，嚴格按試劑盒說明書進行操作，病毒載量＜103 拷貝/ml判定HCV RNA定量結果為陰性，103~105拷貝/ml為少量病毒復制，106~107拷貝/ml為中量病毒復制，＞1.0×108 拷貝/ml判定為大量病毒復制。所有試劑均在有效期內使用。

1.4統計學方法

應用統計軟件spss13.0對相關數據進行統計學分析處理，采用χ²檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

二、實驗結果

2.1 HCV-cAgELISA和HCV-PCR結果

83例抗-HCV陽性血清標本中，分別有33和36例HCV-cAg和HCV RNA陽性，陽性率分別為39.8%和43.4%。500例ALT異常但抗-HCV陰性的血清有3例HCV-cAg和HCV RNA均陽性.

2.2  HCV-cAg和HCVRNA檢測結果的符合率

抗-HCV陽性血標本中HCV-cAg和HCV RNA均為陽性的32例，同為陰性的46例，抗-HCV陽性血標本中HCV-cAgELISA和HCV-PCR符合率為94.0%；另有1例HCV-cAg陽性而HCV RNA陰性，4例HCV RNA陽性而HCV-cAg陰性。

500例ALT異常但抗-HCV陰性的血清HCV-cAg和HCV RNA檢測結果完全一致，HCV-cAg和HCV RNA符合率為100%。HCV RNA檢測陽性判定為HCV確證陽性，HCV-cAgELISA方法的靈敏度為89.7%(35/39)，特異性為99.8％（543/544）。

2.3  HCV RNA拷貝數與HCV-cAg陽性檢出率的相關性 

39例HCV RNA陽性血液中有35例HCV-cAg陽性，HCV-cAgELISA陽性檢出率為89.7%。觀察不同HCV RNA拷貝數血清樣本HCV-cAgELISA陽性檢出率，發現35例HCV-cAg和HCV RNA均陽性樣本，HCV RNA拷貝數較高≥1.0×105拷貝/ml，而4例HCV RNA陽性但HCV-cAg陰性樣本HCV RNA拷貝數較低，其中3例為103數量級。

ELISA檢測抗-HCV仍是我國目前判斷HCV感染的常規篩選方法，廣泛用于無償獻血者、醫院受血者HCV感染篩查及HCV感染實驗室診斷，然而HCV感染到血清抗-HCV陽性要經歷一個約40~70天的“窗口期”，這一時期ELISA抗-HCV試劑無法檢出HCV感染［4-6］。

由于“窗口期”存在而導致輸血性HCV感染的糾紛國內外都有報道［8,9］。為減少“窗口期”存在導致的HCV感染發生，歐美國家紛紛推出靈敏度更高的HCV-PCR和HCV-cAg ELISA檢測HCV感染［4-6，8-10］。HCV RNA是病毒復制的直接標志，但該方法需要特殊儀器、且人員配備的要求高還受很多因素影響[5,6]。

血清HCV-cAg陽轉僅比HCV RNA遲1~2d，用ELISA檢測在儀器、人員配制要求比HCV-PCR易于滿足，有文獻報道HCV-cAgELISA用于血清抗-HCV陽轉前的早期HCV感染的診斷以及HCV感染者治療前后病毒血癥情況的分析［4-7］。