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表1 HCV抗體陽性和陰性標本中抗原的檢出率情況（略）
注：與HCVAb(-)比較，P＜0.05
表2 HCVAg與HCV RNA的符合率情況（略）
3 討論
HCV的主要特征為具有較高的發展為慢性肝炎的趨勢，而且相當一部分患者可能發展為肝硬化甚至肝癌。目前具有典型臨床表現的急性丙肝患者已經很少見，故實驗室的早期診斷對控制HCV感染的傳播具有非常重要的意義，人們一直在致力于尋找和研究靈敏度高、特異性強、操作簡單、經濟實用、易于推廣的檢測方法和檢測項目。
人感染HCV后，存在一個相當長時間的病毒血癥陽性，血清抗體陰性，這一段時間稱為檢驗“窗口期”，HCV在體內復制活躍，傳染性很強。采用ELISA方法檢測HCV抗體(IgG)是臨床最常用的手段之一，從第1代試劑到第3代試劑的進步，大大提高了HCV抗體檢測試劑的靈敏度。但是，由于HCV具有高度的變異性,加上我國應用ELISA進行HCV檢測的試劑盒及試劑抗原來源各異,致使HCV陽性率有較大的差別。而且，IgG抗體陽性者無法判斷是否首次或再次新近感染，且效價高低并不能反映HCV感染的進程。鑒于IgM類抗體較IgG出現早,人們認為其效價高低在一定程度上可以代表急性期感染，在一定程度上也可以縮短HCV感染的“窗口期”，但是目前HCV IgM類抗體的檢測方法和臨床價值尚存在爭議。
聚合酶鏈技術(PCR)應用于檢測HCV RNA，也可以極大地縮短窗口期，檢測HCV RNA具有高度靈敏度和特異性。但其操作要求、設備條件、工作環境均有較高的標準,其檢測的結果還與引物、參數的設計、試劑濃度和Tag酶的存在及儀器質量均有很大關系。
應用ELISA法早期檢測丙型肝炎病毒核心抗原(HCVcAg)可以克服抗HCV ELISA篩選的局限從而達到縮短窗口期的目的，也是降低HCV感染的有效途徑之一。而且總HCV核心抗原檢測也可用于監控慢性丙型肝炎患者體內病毒載量，評價抗HCV治療效果。
本文數據顯示62份HCVAb陽性血清和29份HCVAb陰性血清HCVcAg檢出率差異有統計學意義(P<0.05)，提示檢測HCVcAg具有一定的特異性。丙型肝炎病毒感染的患者在感染后1～4周內血清HCV RNA轉陽，同時HCVAg出現，隨后ALT增高和HCV抗體轉陽［5］。抗-HCV抗體不同于其他抗體，它不是一種保護性抗體，臨床上把它作為感染的證據，但由于免疫功能的差異，部分患者感染后出現抗-HCV較晚，特別是免疫功能低下者或免疫抑制劑治療(經常輸血的白血病)的患者可能不產生抗HCV抗體。急性期的檢出率低，部分病例可出現假陰性。故通過檢測HCVAg，可以縮短病毒感染窗口期，有助于篩查和早期診斷。
本文29份HCV RNA陽性血清檢出HCVAg應全部陽性，但本次實驗僅16個。導致HCVcAg陰性的原因可能有：(1)檢測抗原反應系統不穩定，所取例數較少，存在抽樣誤差，導致其敏感性不高，特異性不好。(2)抗原出現早，抗體出現后與抗原結合，故檢測不出抗原的存在。(3)抗體出現晚，消失也晚，故當患者處于恢復期時，抗原消失抗體仍存在。此外，HCV是一種極易發生突變的RNA病毒，由于其基因突變率高，導致丙肝的抗原變異性大。
本文16份抗原陽性標本中HCV RNA陽性14份，這一結果也進一步驗證了HCV抗原檢測方法的特異性，也提示抗原檢出的可能性。另外，尚有2份抗原陽性樣本未檢測出HCV RNA，推測樣本的保存條件在一定程度上影響PCR的結果，同時此方法也存在一些不足之處，其根本原因尚不明確，有望進行大量的進一步分析。
在本研究結果中，發現29份抗體陰性標本中檢出抗原陽性2份，HCV RNA證實均為陽性，證明抗原檢測在一定程度上可以彌補抗體檢測的不足，更有效地控制HCV的傳播。
本文RNA陰性患者抗原無陽性，一致性較高，但其中仍有5例可疑，可給臨床提示存在HCV感染的風險。62份RNA陰性患者血清抗原陰性，抗體仍有35份陽性。經調查，這35例均為接受藥物治療患者，患者處于疾病恢復期，此時血中病毒核糖核酸水平處于低復制或無復制狀態，血清中已無HCV RNA存在或病毒載量較低，定量PCR和HCVAg無法檢出，但抗HCV仍未消失。
陳安心等［6］利用Ortho公司的總HCV核心抗原檢測試劑和HCV RNA定量檢測技術共同檢測了116位接受聯合治療的患者的病毒血癥情況，結果發現，在治療前和治療3個月后，總HCV核心抗原檢測的效果在治療早期(4周以內)要優于HCV RNA檢測，在3個月后達到最佳效果。與HCV RNA檢測相比，在監測治療和預測PEG修飾的干擾素和利巴韋林聯合治療反應性上，監測血清中總HCV核心抗原水平是一種精確和可*的方法，可替代HCV RNA定量檢測。
有研究表明［7］，與抗HCV相比，HCV抗原測定和HCV定量PCR都能顯著將HCV窗口期平均縮短至36 d，但HCV RNA檢測影響因素多，其中最重要的是防止核糖核酸酶(RNase)污染。所有器材均必須高壓滅菌，且需專業人員操作，應注意實驗人員手的污染，手套要完整并經常更換。該實驗要求嚴格，成本高，價格昂貴。而HCV抗原ELISA檢測具有較高的敏感性及特異性，可明顯縮短HCV感染的窗口期，實驗只需3 h，操作簡便，成本較低，不需添加任何儀器設備就能完成，適合大規模篩查和大多數地區醫院的常規檢查。
【參考文獻】
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2 Widel A,Molnegren V,Pieksma F,et al.Detectionofhepatitis Ccoreantigeninserumor plasaasamar kerofhepatitis Cviraemiain theserologicalwindowphase.Transfus Med,2002,12:107113.
3 Sanz C,Tassies D,Costa J,et al.The first case of HCVinfection detected be fore seroconversion in blood donors tested by HCV core antigen ELISA.Lransfusion,2002,42:505506.
4 aperche S,Le Marrec N,Simon N,et al.A new HCV corean antigen assay based on disassociation of immune complexes:an alternative to molecular biology in the diagnosis of early HCV infection.Transfusion tion,2003,43:958961.
5 中華醫學會傳染病學會.病毒性肝炎防治方案.中華傳染病雜志，2001，19：5662.
6 陳安心，童愛飛.患者輸血前血液傳染指標檢測結果分析.中華醫院感染學雜志，2004.14：387389.
7 張賀秋.丙型肝炎病毒核心抗原檢測試劑的臨床評價.中國醫學檢驗雜志，2006，7：221223.
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