鮮玉萍，楊紅英（成都市第六人民醫院檢驗科　６１００５１）

【摘要】目的 應用酶聯免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）分別檢測丙型肝炎病毒核心抗原（ＨＣＶ－ｃＡｇ）和抗體（ＨＣＶ－Ａｂ），了解丙型肝炎病毒核心抗原檢測的意義。方法　采用ＨＣＶ－ｃＡｇ試劑盒及ＨＣＶ－Ａｂ試劑盒，對２００例來自手術前篩查的血清樣本和 ３６例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者的血清樣本進行ＨＣＶ－ｃＡｇ和ＨＣＶ－Ａｂ檢測，陽性者用反轉錄聚合酶鏈反應（ＲＴ－ＰＣＲ）檢測ＨＣＶ－ＲＮＡ證實。結果　２００例術前篩查樣本ＨＣＶ－Ａｂ均為陰性，ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性３例，其中ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性１例；３６例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者ＨＣＶ－Ａｂ全部陽性，其中檢出

ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性２１例，ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性２４例。ＨＣＶ－ｃＡｇ與

ＨＣＶ－ＲＮＡ符合率為８７．５％（２１／２４）。結論　ＨＣＶ－ｃＡｇ檢出時間早于

ＨＣＶ－Ａｂ，對臨床樣本同時進行丙型肝炎病毒核心抗原和抗體的ＥＬＩＳＡ檢測，能夠明顯提高丙型肝炎診斷符合率。

【關鍵詞】丙型肝炎病毒抗體；丙型肝炎病毒核心抗原；反轉錄聚合酶鏈反應

ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－９４５５．２０１２．１８．０３３

文獻標志碼：Ａ文章編號：１６７２－９４５５（２０１２）１８－２３２０－０２

我國的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染率大約為３．２％，而多數ＨＣＶ感染都是無癥狀性的，少數引起急性肝炎的患者，其癥狀也比甲型和乙型急性肝炎的癥狀輕。但感染ＨＣＶ后形成慢性感染的概率很高，且有相當比例患者會發展成肝硬化、肝癌。為此，較早檢出ＨＣＶ感染，及時有效地阻斷ＨＣＶ傳播非常重要。丙型肝炎標志物包括丙型肝炎病毒核心抗原（ＨＣＶ－ｃＡｇ）和抗體（ＨＣＶ－Ａｂ）及ＨＣＶ－ＲＮＡ。本文應用酶聯免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）分別檢測ＨＣＶ－ｃＡｇ和ＨＣＶ－Ａｂ，并對ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性的標本進行ＨＣＶ－ＲＮＡ證實，以了解ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測的意義，現報道如下。

１　資料與方法

１．１　一般資料　住院患者標本來自２０１２年２月本院入院手術前進行病毒篩查的血液標本，隨機抽取２００例，采用雙盲法同時檢測ＨＣＶ－Ａｂ和ＨＣＶ－ｃＡｇ。２０１１年４月至２０１２年４月本科ＨＣＶ－Ａｂ檢 測 陽 性 的 血 液 標 本３６例，分 離 血 清 并 置－２０℃冰箱保存。

１．２　方法與試劑

１．２．１　ＨＣＶ－Ａｂ檢測采用鄭州安圖生物公司生產的ＨＣＶ－Ａｂ　ＥＬＩＳＡ試劑盒。按說明書上的方法操作，陽性結果經二次復檢。

１．２．２　ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測采用山東萊博公司商業化的ＨＣＶ－ｃＡｇＥＬＩＳＡ試劑盒，按說明書上的方法操作，陽性結果經二次復檢。

１．２．３　ＨＣＶ－ＲＮＡ

檢測采用中山大學達安基因股份有限公司生產的丙型肝炎病毒ＲＮＡ聚合酶鏈反應（ＰＣＲ）檢測試劑盒，按說明書上的方法操作。

２　結　　果

２．１　ＨＣＶ－Ａｂ、ＨＣＶ－ｃＡｇ、ＲＴ－ＲＮＡ檢測結果見表１。

２．２　２００例住院術前篩查患者標本ＨＣＶ－Ａｂ檢測均為陰性，ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性３例，占１．５％，其中ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性１例。

表１　ＨＣＶ－Ａｂ、ＨＣＶ－ｃＡｇ、ＲＴ－ＲＮＡ檢測結果（ｎ）

項目	HCV-cAg(+)		HCV-cAg(-)
	RT-RNA(+)	RT-RNA(-)	RT-RNA(+)	RT-RNA(-)	未做RT-RNA(+)
HCV-Ab(+)	21	0	3	12	0
HCV-Ab(-)	1	2	0	0	197

２．３　３６例ＨＣＶ－Ａｂ陽性的樣本檢出ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性２１例，ＨＣＶ－ｃＡｇ與ＨＣＶ－Ａｂ陽性符合率為５８．３％（２１／３６）；ＨＣＶ－ＲＮＡ與ＨＣＶ－Ａｂ陽性符合率為６６．７％（２４／３６）；ＨＣＶ－ｃＡｇ與ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性符合率為８７．５％（２１／２４）。

３　討　　論

ＨＣＶ感染通常是持續性的終生感染，抗體檢測是一個非常有效的方法。但因感染ＨＣＶ后，抗ＨＣＶ出現較慢，一般情況下，抗體的血清學轉換可以延遲到暴露后幾個月才發生［１］；此時可發生抗ＨＣＶ的假陰性（也就是說在抗體可檢出之前或在血清學轉換之中即所謂的“窗口期”），故在早期診斷丙型肝炎感染上有困難。

反轉錄聚合酶鏈反應（ＲＴ－ＰＣＲ）是一個很敏感的方法。ＨＣＶ－ＲＮＡ可以在暴露后的１～２周被檢出^［２］。另外，在一些ＨＣＶ感染后恢復期的人群中，抗ＨＣＶ可能會逐漸降低到檢測限之下^［３］；或免疫功能低下的ＨＣＶ感染者，抗ＨＣＶ會持續陰性，這時，ＨＣＶ－ＲＮＡ的 檢測是感染的惟一證據。故使用ＲＴ－ＰＣＲ技術檢測ＨＣＶ－ＲＮＡ是判斷感染最有效的方法。但其技術復雜，環境、條件要求較高，不易被多數實驗室接受和推廣。ＨＣＶ－ｃＡｇ幾乎與ＨＣＶ－ＲＮＡ同時出現，采用單克隆抗體制備 的ＥＬＩＳＡ試 劑 盒 檢 測ＨＣＶ核 心 抗 原，經ＨＣＶ－ＲＮＡＰＣＲ法復核，符合率大于８５％^［４］；另有報道，ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測可以較ＨＣＶ－Ａｂ檢出時間提早２３～４６ｄ^［５］，且ＥＬＩＳＡ法較ＰＣＲ法簡便、快速，現有能開展ＥＬＩＳＡ檢測的實驗室無需增加特殊設備，均可檢測。本次結果在被測的３６例ＨＣＶ－Ａｂ陽性樣本中ＨＣＶ－ｃＡｇ陽 性２１例，ＨＣＶ－ＲＮＡ陽 性２４例，符 合 率 為８７．５％（２１／２４），與文獻報道一致。因此，在不具備ＲＮＡ檢測條件的實驗室開展ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測是很好的篩查方法^［６］。

３６例ＨＣＶ－Ａｂ陽性僅檢出２１例ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性，ＨＣＶ－ｃＡｇ檢出率低的原因，可能一是由于有抗體的存在，干擾了抗原的檢測或樣本中的ＨＣＶ抗體可能與用于核心抗原檢測的單克隆抗體競爭結合抗原而造成ＨＣＶ－ｃＡｇ的假陰性，為避免這種干擾，需對單克隆抗體作進一步篩選或作丙型肝炎核心總抗原檢 測。二 是 由 于ＨＣＶ－Ａｂ是 丙 型 肝 炎 總 抗 體，單 純ＨＣＶ－Ａｂ陽性說明現癥患者或既往感染患者，恢復期患者血清中ＨＣＶ－Ａｂ也陽性。本研究２００例ＨＣＶ－Ａｂ檢測陰性的臨床樣本中，檢出ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性３例，經ＨＣＶ－ＲＮＡ確認其中有１例陽性。表明“窗口期”的患者因測不出ＨＣＶ－Ａｂ易被漏診。僅用ＨＣＶ－Ａｂ檢測將有可能存在０．５％（１／２００）漏診的風險，就這０．５％也是不容忽視的，尤其是對手術前ＨＣＶ篩查的患者，涉及術中感染責任、用血安全等問題，ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測在一定程度上降低了這些風險。因此，認為ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測可作為ＨＣＶ抗體檢測的補充試劑聯合應用臨床，但其敏感性和特異性有待提高。

參考文獻：

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（收稿日期：２０１２－０５－２５）