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邵 芳
（武漢市第一醫院檢驗科，湖北武漢４３００２０）
摘要：［目的］探討ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性丙肝患者核心抗原（ＨＣＶ－ｃＡｇ）、抗體（ＨＣＶ－Ａｂ）以及ＨＣＶ－ＲＮＡ含量３種檢測指標與丙氨酸氨基轉移酶（ＡＬＴ）水平的相關性及其臨床意義。［方法］對１００例ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性丙肝患者應用酶速率法檢測ＡＬＴ含量、ＥＬＩＳＡ法檢測ＨＣＶ－ｃＡｇ、ＣＬＩＡ法檢測ＨＣＶ－Ａｂ、ＦＱ－ＰＣＲ法檢測ＨＣＶ－ＲＮＡ，并對所得數據進行統計分析。［結果］１００例患者血清中ＨＣＶ－Ａｂ陽性率為９７．０％，ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性率為８３．０％；ＨＣＶＲＮＡ載體含量越高，ＨＣＶ－Ａｂ陽性率越高；ＡＬＴ含量的變化與ＨＣＶ－ＲＮＡ載體含量并無明顯相關性（Ｐ＞０．０５）； ＡＬＴ異常率隨著ＨＣＶ－ＲＮＡ含量的增高而升高，呈正相關（Ｐ＜０．０５）。［結論］ＨＣＶ－Ａｂ檢測可反映機體對ＨＣＶ 感染的免疫狀態，能間接證實ＨＣＶ感染；ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性和特異性較高，ＨＣＶ－ＲＮＡ與ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性檢出率呈現一致性，且ＡＬＴ異常率隨著ＨＣＶ－ＲＮＡ含量的增高而升高，可以反映臨床病情；３種方法同時檢測能準確診斷丙肝病毒的感染，以及預測是否具有傳染性，聯合ＡＬＴ可有效預測和評價肝臟損傷和藥物療效。
關鍵詞：肝炎；酶免疫吸附試驗；化學發光免疫測定法；聚合酶鏈式反應；丙氨酸氨基轉移酶
中圖分類號：Ｒ５７５．１ 文獻標志碼：Ａ 文章編號：１６７１－０３８Ｘ（２０１４）０２－０８０－０３
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丙肝病毒（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ?。谩。觯椋颍酰螅龋茫郑┦菃喂烧湥遥危敛《荆c其他ＲＮＡ病毒一樣，ＨＣＶ基因組有很大的變異性，可引起其分子生物學行為、感染性、臨床致病性及對藥物治療的反應等諸方面的不同。由于缺乏保護性疫苗，及時準確的實驗室診斷對控制ＨＣＶ 的傳播有著重要意義［１］。ＨＣＶ－ＲＮＡ 陽性或丙氨酸氨基轉移酶（ＡＬＴ）持續增高者是
ＨＣＶ患者慢性化的特征。目前對ＨＣＶ 感染的實驗室診斷主要以機體所產生的特異性機體［抗－ ＨＣＶ（ＨＣＶ－Ａｂ）］、ＨＣＶ 特異性抗原（ＨＣＶ－ｃＡｇ） 以及ＨＣＶ－ＲＮＡ［２］。本研究通過檢測１００例ＨＣＶＲＮＡ 陽性患者中ＨＣＶ－ｃＡｇ、ＨＣＶ－Ａｂ 及ＨＣＶＲＮＡ的交叉指標，并分析其與ＡＬＴ的相關性。
１ 對象與方法
１．１ 對象
入選對象均為２０１２－０１—２０１３－１０期間就診于本院住院部或門診部、經ＦＱ－ＰＣＲ 法檢測ＨＣＶＲＮＡ為陽性并確診為丙肝患者，共１００例，男６９ 例，女３２例；年齡２０～６０歲。
１．２ 方法
采用Ｏｌｙｍｐｕｓ?。粒眨玻罚埃叭詣由治鰞x，應用酶速率法檢測ＡＬＴ 含量，其正常范圍為０～ ４０ＩＵ／Ｌ。按照ＨＣＶ－ＲＮＡ 含量不同將標本分成１０７、１０６、１０５、１０４、１０３和＜１０３ｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ?。督M，分析ＨＣＶ載體不同數量級中ＨＣＶ－ｃＡｇ的陽性率以及ＡＬＴ的異常率。ＥＬＩＳＡ法檢測ＨＣＶ－ｃＡｇ、化學發光免疫測定（ＣＬＩＡ）法檢測ＨＣＶ－Ａｂ。
１．３ 統計學處理方法
實驗數據用ＳＰＳＳ?。保埃败浖M行統計分析。
２ 結果
２．１ １００例ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性患者血清檢測結果
１００例ＨＣＶ－ＲＮＡ 陽性患者檢測顯示：ＨＣＶＡｂ陽性率為９７％（９７ 例），ＨＣＶ－ｃＡｇ 陽性率為８３％（８３例）。
２．２ ＨＣＶ－ＲＮＡ含量與ＨＣＶ－ｃＡｇ、ＡＬＴ的關系
檢測顯示：ＨＣＶ－ＲＮＡ 載體含量越高，ＨＣＶｃＡｇ陽性檢出率越高，ＡＬＴ異常率隨著ＨＣＶ－ＲＮＡ 含量的增高而升高，詳見表１。
２．３?。龋茫郑遥危梁繉抵蹬cＡＬＴ含量關系
ＨＣＶ－ＲＮＡ含量對數值與ＡＬＴ含量關系相關性分析結果表明：ＡＬＴ 含量的變化與ＨＣＶ－ＲＮＡ 載體含量并無明顯相關性（Ｐ＞０．０５），如圖１所示； 而ＡＬＴ異常率隨著ＨＣＶ載體含量的升高而增加， 即呈正相關（Ｐ＜０．０５），如圖２所示。
表１?。龋茫郑遥危梁颗cＨＣＶ－ｃＡｇ、ＡＬＴ的關系
例（%）
圖１ ＨＣＶ－ＲＮＡ含量對數值與ＡＬＴ含量的散點圖
圖２ ＨＣＶ－ＲＮＡ含量對數值與ＡＬＴ異常率的散點圖
３ 討論
ＨＣＶ－ＲＮＡ在機體感染ＨＣＶ１～２周后即可被檢測，它能直接反映病毒的復制及機體的傳染性，能夠作為毒血癥的標志［３］。ＦＱ－ＰＣＲ 法檢測ＨＣＶＲＮＡ具有早期、敏感性和特異性高等特性，能夠直接反映體內ＨＣＶ 的復制程度，而且對于ＨＣＶＲＮＡ含量的監測有利于觀察患者肝臟的功能［４］。
應用干擾素或者抗病毒治療后部分患者的ＨＣＶＲＮＡ載體含量下降ＡＬＴ 數值可能也隨之下降。當機體ＨＣＶ－ＲＮＡ 載量位于１?。埃埃埃悖铮穑椋澹螅恚旄浇鼤r，ＨＣＶ－Ａｂ的Ｓ／ＣＯ 值也處于臨界。因此，臨床上將ＨＣＶ－ｃＡｇ的檢測，以及應用ＣＬＩＡ法測ＨＣＶＡｂ與ＰＣＲ熒光定量法測ＨＣＶ－ＲＮＡ 三者有效聯合，能夠提高丙肝檢出率和診斷可靠性，結合ＡＬＴ 的結果可幫助臨床了解ＨＣＶ在體內的復制對肝臟的炎癥狀態，對于臨床ＨＣＶ感染早期準確診斷、監測病毒復制情況、觀察抗病毒藥物療效等具有較高的臨床應用價值。
ＨＣＶ－Ａｂ作為特異性免疫應答產物，能間接反映機體感染情況。ＨＣＶ－Ａｂ檢測時間段為機體感染病毒后７０ｄ，然而ＨＣＶ－Ａｂ是非中和性抗體，只能作為ＨＣＶ感染的標志，在體內可維持１０年。用ＣＬＩＡ法檢測ＨＣＶ－Ａｂ既能定性亦可定量，是目前國際公認的血清免疫學標志物檢測的“金標準”，但ＨＣＶ－Ａｂ陽性不能判定體內是否有ＨＣＶ復制，只有檢測到ＨＣＶ－ＲＮＡ才能確定有無傳染性。
ＡＬＴ 存在于肝細胞的胞質和線粒體中，在ＨＣＶ病毒損傷肝細胞時可通過細胞膜釋放入血中， ＡＬＴ升高在一定程度上反映肝細胞損害和壞死的程度［５］。本研究表明ＡＬＴ異常率隨ＨＣＶ－ＲＮＡ含量呈正相關，這可能與肝臟損傷的程度及患者的個體差異、免疫應答等因素有關，免疫系統越活躍肝臟損傷反而越重。ＨＣＶ－ＲＮＡ 含量不能反映病毒復制靜息肝細胞病毒狀態和肝臟損傷的程度，必須結合ＡＬＴ的結果全面了解ＨＣＶ 在體內的復制狀況和肝臟損傷程度。研究顯示丙肝患者在接受干擾素與利巴韋林聯合治療后，ＨＣＶ－ＲＮＡ載體含量明顯下降，然而ＡＬＴ含量卻呈上升趨勢，表明患者機體產生了抗病毒反應（或者ＨＣＶ－ＲＮＡ含量很低），而產生一過性的ＡＬＴ升高［６］。
本研究結果表明，１００例ＨＣＶ－ＲＮＡ陽性患者血清中ＨＣＶ－Ａｂ陽性率為９７％，ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性率為８３％，ＨＣＶ－ＲＮＡ載體含量越高，ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性檢出率越高，ＡＬＴ 異常率隨著ＨＣＶ－ＲＮＡ 含量的增高而升高，即呈正相關，提示其聯合檢測可以反映臨床病情。ＨＣＶ－ＲＮＡ 與ＨＣＶ－ｃＡｇ呈現一致性， 其聯合檢測能反映病毒復制。且進一步證明ＡＬＴ 異常率隨著ＨＣＶ－ＲＮＡ含量的增高而升高，呈正相關（Ｐ＜０．０５）。由此可見ＨＣＶ－Ａｂ檢測可反映機體對ＨＣＶ 感染的免疫狀態，能間接證實ＨＣＶ 感染，ＨＣＶ－ＲＮＡ具有早期、敏感性和特異性較高等特點［７］。ＨＣＶ－ＲＮＡ與ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性檢出率呈現一致性，且ＡＬＴ異常率隨著ＨＣＶ－ＲＮＡ 含量的增高而升高，可以反映臨床病情。
ＨＣＶ－ｃＡｇ作為一種新的ＨＣＶ感染診斷指標， 可用于獻血人員的篩查，且因其檢測時間段為感染后１４～７０ｄ，窗口期比ＨＣＶ－Ａｂ短，可明顯增強輸血安全，亦能監測抗病毒治療療效。ＨＣＶ－ｃＡｇ陽性率與ＨＣＶ－ＲＮＡ 陽性率高度一致。而且與ＨＣＶ－ＲＮＡ的動力學變化有一定的相關性［８］，因此ＨＣＶ－ｃＡｇ的檢測對ＨＣＶ 的早期感染以及免疫功能紊亂和一些不產生ＨＣＶ－Ａｂ的患者很有價值。因此ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測目前可作為丙肝患者的補充檢測指標，但不能取代ＨＣＶ－Ａｂ。待ＨＣＶ－ｃＡｇ檢測試劑標準化后尚可作為丙肝患者常規檢測的早期檢測指標。因此，將３種檢測方法同時檢測能準確診斷ＨＣＶ的感染，以及預測是否具有傳染性，３種檢測方法聯合檢測，與ＡＬＴ動態監測可有效預測和評價肝臟損傷情況，更利于監測病變的發展、藥物療效以及預后。
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