丙型肝炎病毒核心抗原檢測的臨床分析

孫勝菲1  于麗紅2130021

長春中醫藥大學第一附屬醫院1   長春市產院2

摘　要　檢測2003年1月～2006年12月間住院及門診患者,150例丙型肝炎患者進行丙型肝病毒核心抗原(HCV-cAg)的檢測并分析其臨床意義。研究表明,HCV感染者肝癌的發生與C 抗原蛋白誘導肝細胞生長失控有關, HCV-cAg 陽性可提醒有癌變的可能。因此HCV-cAg可作為肝癌的輔助診斷。HCV-cAg的檢測還可用于干擾素、抗病毒藥物療效的觀察。

關鍵詞　丙肝核心抗原　檢測　臨床分析

病毒性肝炎是由肝炎病毒引起的嚴重危害人類健康的傳染性疾病,最常見的為甲型病毒性肝炎、乙型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎^{[1 ]} 。丙型肝炎是一種主要經血傳播的傳染病,其嚴重威脅人們身體健康,目前尚無特殊的防治方法。目前我國阻斷丙型肝炎傳播的主要方法是酶聯

免疫吸附法( ELISA) 檢測丙型肝炎抗體(抗- HCV) 篩選供血員。然而抗- HCV的出現是在HCV 感染后的6 - 12 周(窗口期) ,所以抗- HCV 陰性并不能排除攜帶HCV 具有傳染性的可能。而HCV 核

心抗原(HCV-cAg) 的檢測可將HCV的檢測的窗口期縮短到15天，降低了HCV經血傳播的風險。本文對150 例丙型肝炎患者進行丙型肝病毒核心抗原( HCV-cAg)的檢測并分析其臨床意義。

資料與方法

標本來源:本院住院及門診患者150例(120 例抗-HCV 陽性,30 例抗HCV陰性) 。

試劑: 抗-HCV 檢測試劑: HCV-cAg試劑:強生ORTHO , HCV-cAg酶免試劑盒批號:A GKl22 HCVRNA 熒光PCR 定量檢測試劑:深圳匹基公司。

方法: ①抗-HCV 檢測: ELISA 方法。②HCV-cAg 檢測:設空白對照一孔,陰性對照,陽性對照各兩孔,樣本稀釋液100μl/ 孔,待測標本1 00μl ,37 ℃孵育90分鐘,洗板6 次,加酶結合物200μl ,37 ℃孵育30 分鐘。再洗板6 次, 加顯色劑200μl 。室溫閉光30 分鐘, 終止, 492nm

(參考波長630nm) 讀板,Cut off = NCx +01040 。③HCVRNA 定量檢測: 熒光定量PCR 法。

結　果

150 例血清標本HCV-cAg陽性47例( 31.3 %) , AL T 增高( 40～1000U/ L↑) 84 例(HCV-cAg 陽性占47 例、單獨HCVRNA 陽性29 例,單獨抗-HCV 陽性8 例) 。150 例丙型肝炎患者HCV檢測結果見表。

表150 例丙型肝炎患者HCV 檢測結果：

n	HCV-cAg( %)	HCV-RNA( %)	Copies/ L
抗-HCV 陽性	120	43 (35.8)	72 (60) 3.12E4. 4.96E7
抗-HCV 陰性	30	4 (13.3)	4 (13.3) 3.12E2-4.96E4

30 例抗-HCV 陰性而4 例HCV-cAg陽性者ALT 增高(分別為40U/ L 、53U/ L 、97U/ L 、158U/ L)。47 例HCV-cAg陽性標本中HBsAg陽性2 例(4.3 %) 。

討　論

丙型肝炎是一種嚴重威脅人們身體健康,主要經血傳播的傳染病,在30 例抗-HCV 陰性標本中HCVCAg 陽性4 例(13.3 %) 提示,這些患者已經感染HCV ,但是由于抗-HCV的出現是在HCV感染后的6～12 周( 窗口期) ,所以抗-HCV 陰性并不能排除攜帶HCV 具有傳染性的可能^{[2 ]} 。而HCV 核心抗原(HCV-cAg) 的檢測可將HCV的檢測的窗口期縮短到15 天,降低了HCV 經血傳播的風險。另外,此4 名感染者肝功能出現不同的改變分別為40U/ L/ 、53U/ L 、97U/ L 、158U/ L) 。說明已影響到肝臟,但是由于窗口期或自身免疫的原因尚未產生抗體而呈陰性,因此應經常到醫院進行檢查。

由于HCV 的窗口期較長( 6～12周) ,HCV 的變異性大,目前抗-HCV 檢測有可能出現漏檢,所以采用更靈敏的檢測方法很重要, HCV-cAg的檢測有利于HCV感染病人的早期發現,特別是某些免疫功能紊亂、免疫功能低下的病人、某些不產生抗體的攜帶者。47 例HCV-cAg陽性標本中, 有2 例HBsAg 陽性(4.3 %) ,提示HCV-cAg作為病毒顆粒的結構之外,還具有基因調節功能, HCV

與HBV 聯合感染的個體,C 抗原蛋白可影響HBV的組裝。從檢測結果表l看出, HCV-cAg陽性的標本, HCVRNA 都出現不同程度的增高,表明HCVCAg 可表達HCV 在體內復制的情況。由于HCVCAg 檢測縮短感染窗口期,因此,用于獻血者檢測,可了解其HCV 感染的進程,阻斷HCV 經血傳播途徑,減少丙型肝炎的感染率。47 例HCVCAg 陽性者ALT 都有不同程度的增高(40～1000U/L) ,表明HCV-cAg可破壞肝細胞,使肝臟受到損害。目前有很多方法進行丙肝抗體的檢測,如抗-HCV E LlSA 法、膠體金法,丙肝病毒主要是通過輸血及血液制品獲得,流行病學資料顯示:在肝癌發病率中等的地區,如日本、意大利、西班牙等國家多由丙型肝炎所致,也有資料表明發達國家的慢性肝病主要與HCV 感染有關研究表明,有資料表明發達國家的慢性肝病主要與HCV感染有關,有報道認為抗-HCV 陽性的急性肝炎中大部分進而演變發展為肝癌, HCV感染者肝癌的發生與C 抗原蛋白誘導肝細胞生長失控有關, HCV-cAg陽性可提醒有癌變的可能。因此HCV-cAg可作為肝癌的輔助診斷。HCV-cAg的檢測還可用于干擾素、抗病毒藥物療效的觀察。

    總之,由于輸血后丙肝引起的醫療糾紛不斷,這已引起了醫學界的極大關注,而且受血次數越多,感染病毒的幾率越高。如患者機體免疫力差,而輸入的血液中肝炎病毒復制活躍,就會造成各種肝炎感染。HCV-cAg檢測對丙型肝炎的預防傳播,了解感染進程及病毒復制以及藥物療效觀察、肝癌的輔助診斷有重要意義。

參考文獻

1．蘇娜. 615 例肝病患者血清丙型肝炎抗體的檢測分析.國際檢驗醫學雜志,2006,27(1):94

2．邢文革,石向東,陳光增,等. 國產丙型肝炎病毒抗體酶免檢測試劑盒的質量評價. 中華肝臟病雜志,2001,9 (5):314